領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
本研究從黑曲霉（Aspergillus niger）中發(fā)掘出一種新型天冬氨酸蛋白酶（AnproA1）。多重序列比對分析表明，該蛋白酶屬于胃蛋白酶樣天冬氨酸蛋白酶A1家族，與產(chǎn)紅青霉來源的天冬氨酸蛋白酶同源性最高（42.6%）。采用多種策略成功實(shí)現(xiàn)了AnproA1在法夫駒形氏酵母中高效分泌表達(dá)。在5 L發(fā)酵罐中進(jìn)行高密度發(fā)酵后，發(fā)酵液中蛋白酶活力為15 250.0 U/mL，蛋白質(zhì)量濃度為14.0 mg/mL。純化后AnproA1的最適pH值和最適溫度分別為2.5和55 ℃，且在pH 2.5～5.5及50 ℃以下具有良好的穩(wěn)定性。該酶具有廣泛的底物特異性，對κ-酪蛋白表現(xiàn)出最高水解活性，其次為血紅蛋白。進(jìn)一步利用AnproA1水解鴨血蛋白（血紅蛋白和血漿蛋白）制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（angiotensin-converting enzyme，ACE）抑制活性肽。血紅蛋白和血漿蛋白水解物表現(xiàn)出ACE抑制活性，其半抑制濃度分別為0.084 mg/mL和0.042 mg/mL。本研究可為天冬氨酸蛋白酶在法夫駒形氏酵母中高效表達(dá)和鴨血蛋白高價(jià)值生物轉(zhuǎn)化提供理論參考。
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